AFLP技術(shù)服務(wù)

AFLP標記技術(shù)是1993年由荷蘭的Zabeau和Vos博士提出并完善的。現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于生物多樣性，指紋圖譜的構(gòu)建，遺傳圖譜的構(gòu)建，基因克隆等諸多研究領(lǐng)域，顯示了廣闊的應(yīng)用前景。AFLP與其他分子標記相比具有：1、DNA 用量少;2、可重復(fù)性好;3、多態(tài)性強;4、分辨率高;5、樣品適用性廣，6、對基因組序列信息依賴性低等優(yōu)點。在物種的多態(tài)性分析中獲得廣泛的應(yīng)用。AFLP的選擇擴增產(chǎn)物目前主要通過兩種方法進行分離檢測，傳統(tǒng)的聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)的方法和自動化程度較高的毛細管凝膠電泳進行檢測。

PAGE方法主要是AFLP的選擇擴增產(chǎn)物經(jīng)過聚丙烯酰胺凝膠電泳得到分離，然后通過銀染將條帶顯現(xiàn)出來，然后通過照相得到相應(yīng)的圖片，優(yōu)點是引物可以是普通引物，價格相對較低，做少量樣本或者大量樣本的引物篩選比較合適，另外還可以對差異條帶進行克隆測序，獲得差異條帶的序列信息。

毛細管電泳檢測方法的優(yōu)點是自動化，可以對大量樣本進行實驗，速度快，后期的條帶讀取可以依靠軟件，降低了人為讀取的標準不一。

1)AFLP服務(wù)內(nèi)容

1 樣本基因組DNA的提取

2 篩選多態(tài)性較好的引物(酶切，預(yù)擴，選擇性擴增)

3-1 在ABI3730xl測序儀上完成數(shù)據(jù)采集

3-2 或是在JY-CX2B型 測序電泳槽上完成PAGE 檢測(可以回收差異帶)

4 數(shù)據(jù)分析：和客戶詳細溝通，確認分析方案：讀取01矩陣(PAGE膠讀取另外收費);聚類分析;多樣性分析;多態(tài)位點數(shù)(AP) 、多態(tài)位點百分率( P) 、平均等位基因數(shù)(N a) 、有效等位基因數(shù)(N e) 、Nei′s基因多樣性指數(shù)(H) 、Shannon′s信息指數(shù)( I) 、遺傳分化度(Gst)等。利用NTSYS進行聚類分析。

2)目前已經(jīng)進行的樣本類型：樹木，草，花卉，昆蟲，魚類，蝦類，真菌等;

3)客戶提供：

★ 基因組DNA：

●至少15μL樣品，濃度為50-100ng/μL;

●2%瓊脂糖電泳檢測有DNA主帶，沒有降解;

●DNA經(jīng)過DNA純化試劑盒或磁珠純化;

●DNA需溶解在TE或滅菌的去離子水里;

●DNA溶解后，肉眼看不到雜色;

★ 植物材料： 新鮮組織，葉片采用硅膠干燥后或干冰運輸;

★ 動物材料： 新鮮組織，無水乙醇封存低溫運輸;

4)報價體系：